Обозначения и сокращения 3 Введение 4 1. Теоретические аспекты 7 1.1 Остаточная болезнь при острых B-лимфобластных 7 1.2 Метод проточной цитометрии при острых B-лимфобластных лейкозах 17 Заключение 28 Список используемой литературы 30

Оценка минимальной остаточной болезни при острых B-лимфобластных лейкозах методом проточной цитометрии

курсовая работа
Медицина
30 страниц
70% уникальность
2019 год
78 просмотров
Миляева Н.
Эксперт по предмету «Биохимия»
Узнать стоимость консультации
Это бесплатно и займет 1 минуту
Оглавление
Введение
Заключение
Список литературы
Обозначения и сокращения 3 Введение 4 1. Теоретические аспекты 7 1.1 Остаточная болезнь при острых B-лимфобластных 7 1.2 Метод проточной цитометрии при острых B-лимфобластных лейкозах 17 Заключение 28 Список используемой литературы 30
Читать дальше
Актуальность работы. При диагностике онкогематологических заболеваний необходимо выявить популяцию патологических клеток и охарактеризовать ее. Для получения характеристик опухолевых клеток используют методы морфологии, иммуноцитохимии, проточной цитометрии, цитогенетики и молекулярной биологии, включая флюоресцентную гибридизацию in situ (FISH), полимеразную ценную реакцию и другие. Кариотипированне и молекулярно-биологические исследования не являются рутинными для многих, в том числе специализированных, клиник, а там, где они проводятся, получение информации отсрочено по времени.


Наши контрольные работы под заказ выполняются профессионалами.


. С клинической точки зрения, это чаще всего подтверждающие (или отрицающие) диагноз исследования, но не определяющие его. Существующий разрыв во времени между получением биологического материала и результатами молекулярно-биологических методов, особенно заметный в онкологии II онкогематологии [6], приводит к тому, что для практических целей оказались максимально адаптированы и дают наиболее воспроизводимые результаты иммуноцитохимия (световая и люминесцентная микроскопия) и проточная цитометрия. При этом не только в клинически сложных случаях, но и в повседневной практике микроскопия все чаще уступает место проточной цитометрии, ставшей основным методом нммунофенотипировапия (ИФТ) в диагностике гемобластозов. Отсутствие алгоритма последовательной оценки маркеров, описывающих основные ростки кроветворения при интерпретации данных анализа биологического материала пациентов онкогематологического профиля, может исказить иммуно-фенотипический диагноз, который в значительной мере определяет характер и время начала терапии с использованием новых протоколов и методов лечения, включающих трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток. За последние 10 лет доказано клиническое значение минимальной остаточной болезни (МОБ) при хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ) и сделаны практические выводы по использованию этого важнейшего прогностического признака в индивидуализации терапии. Проточноцитометрическая диагностика МОБ стала стандартизованной как по набору используемых антител, так и по их комбинациям. Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) — опухолевое лимфопролиферативное заболевание из моноклональных В-лимфоцитов. Заболевание, как правило, протекает индолентно, и главным симптомом в течение ряда лет является вялое нарастание абсолютного лимфоцитоза крови. Поскольку клетки ХЛЛ являются зрелыми (периферическими, посткостномозговыми) В-лимфоцитами, то заболевание рассматривается в рубрике периферических В-клеточных лимфом (ВОЗ, 2008). Клетки В-ХЛЛ отличаются от нормальных В-лимфоцитов и клеток периферических В-клеточных лимфом (лимфомы из клеток мантии, фолликулярной, лимфомы из клеток маргинальной зоны) рядом особенностей. Проточная цитометрия имеет ряд преимуществ в определении МОБ при В-ХЛЛ, главными из которых являются большая доступность и применимость метода более чем у 95 % больных, а также отсутствие строгой необходимости в информации относительно иммунофенотипа клеток В-ХЛЛ до лечения. В основе лабораторной диагностики острых лейкозов (OJI) лежит выявление в периферической крови, костном мозге или спинномозговой жидкости бластных клеток. Подробное морфологическое и цитохимическое описание разных типов бластов обязательно присутствует в каждом руководстве по онкогематологии, но фактически требует от патолога значительного опыта, времени и далеко не всегда дает возможность однозначно описать бласты, принадлежащие к разным клеточным линиям и уровням дифферепцировки. Морфологические критерии классификации, разработанной в конце 1970-х годов патологами и гематологами Франции, Америки и Великобритании (ФАБ), сохранили свою значимость для оценки бластов миелоидного, но не лимфоидного пронсхождения [27]. В настоящее время основой для диагностики заболеваний, связанных с пролиферацией гемопоэтическнх клеток предшественников и клеток крови на разных стадиях дифференцировки служит классификация ВОЗ (2000 г.), наряду с которой применяют и ранее разработанные иммуногематологнческие классификации [4]. Так как ранее, в 80-е годы XX пека, острый лейкоз рассматривался как блокирование дифференцировки клетки на определенной стадии развития, то и варианты лейкозов получили свое название соответственно стадиям дифферепцировки, антигены которых выявлялись набластах в первую очередь. В соответствии с этими представлениями при постановке диагноза учитывалась экспрессия каждого маркера отдельно, как самостоятельный признак. Такой подход был обусловлен не только теоретическими представлениями о патогенезе острого лейкоза, но и методическими возможностями ИФТ. В настоящее время очевидно, что клональность происхождения не означает неизменности фенотипических характеристик лейкозных бластов в течение болезни, но нозологические формулировки сохранили прежнее звучание. Новизна исследования заключается в оценке минимальной остаточной болезни при острых B-лимфобластных лейкозах методом проточной цитометрии. Объект исследования – остаточная болезнь при острых B-лимфобластных лейкозах. Предмет исследования – метод проточной цитометрии. Методы исследования – анализ, обобщение полученной информации.

Читать дальше
Таким образом, метод проточной цитометрии основан на том, что лейкозные клетки имеют аномальный иммунофенотип. Процедура определения МОБ с его помощью состоит в выделении ядерных клеток крови или костного мозга, с дальнейшей их инкубацией с моноклональными антителами, специфичными к поверхностным антигенам лейкозных клеток и меченными флуоресцентными группами. При пропускании полученных проб через проточный цитометр, регистрируется флуоресцентный сигнал от клеток, несущих антитело. Наиболее точные результаты получают с помощью мультипараметрической проточной цитометрии при использовании 4-6 антител, меченных разными флуорофорам. К достоинствам метода относят применимость в тех ситуациях, когда отсутствуют генетические маркеры (химерные гены или другие генетические аномалии), относительную дешевизну и быстроту (1–2 дня). Теоретически чувствительность метода может достигать 10–6, но на практике она гораздо ниже. К факторам, снижающим чувствительность проточной цитометрии, относят: недостаточное различие антигенных профилей опухолевых и нормальных клеток, существование нескольких субпопуляций лейкозных клеток, некоторые из которых малочисленны и поэтому трудно определяемы, неспособность отследить изменение иммунофенотипа лейкозных клеток в период между диагнозом и рецидивом, необходимость подсчета большого числа клеток и использования высококвалифицированных кадров, потеря клеток, зависящая от типа клеток и процедуры, используемой для их выделения. Если иммунофенотип лейкозных клеток достаточно отличим от иммунофенотипа нормальных клеток, то чувствительность составляет 10–4. В остальных случаях, когда иммунофенотипы лейкозных и нормальных клеток частично перекрываются, чувствительность детекции понижается до 10−3. Для достижения большей специфичности раньше предлагалось для каждого пациента определять индивидуальный иммунофенотип лейкозных клеток, используя большой набор антител, и сравнивать этот иммунофенотип с иммунофенотипом нормальных клеток костного мозга того же пациента для нахождения максимальной разницы. Однако на конференции Изменчивость иммунофенотипа лейкозных клеток в период между диагнозом и рецидивом, которая наблюдается у 90% пациентов, − еще более серьезная проблема, часто приводящая к невозможности детекции МОБ и возникающая, вероятно, либо из-за нестабильности генома злокачественных клеток, либо из-за экспансии при рецидиве небольшого пула лейкозных клеток, фенотипически отличающегося от основного и недетектируемого при постановке диагноза. Вероятно, со временем удастся выявить закономерности изменения иммунофенотипов лейкозных клеток, сопоставив эти изменения с рекуррентными генетическими нарушениями, свойственными тому или иному виду лейкоза, как, например, это удалось выявить для хромосомной транслокации.
Читать дальше
1. Антипова, А. С. Острые лейкозы со смешанным фенотипом: клиниколабораторные особенности и прогноз / А.С. Антипова // Клиническая онкогематология. - 2015. – №2. – С.16–100. 2. Бабяк, А. С. Острые лейкозы / А.С. Баяк // Международный студенческий научный вестник. – 2018. – № 4-2. 3. Боровиц М.Д. Выявление минимальной остаточной болезни у детей с острым лимфобластным лейкозом / М.Д. Борович // Иммунология гемопоэза - 2016. - №7. – С.8-20. 4. Бойченко, Э. Г. Острый лимфобластный лейкоз из ранних предшественников Т-клеток (обзор литературы и собственные клинические наблюдения) / Э.Г. Бойченко // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2015. - №1. - С. 38–45. 5. Безнос, О. А. Определение минимальной остаточной болезни при В-линейных острых лимфобластных лейкозах с использованием подходов EuroFlow / О.А. Безнос // Клиническая онкогематология. - 2017. - №10. - С.158–68. 6. Безнос, О. А. Подходы к оценке минимальной остаточной болезни при В-линейных острых лимфобластных лейкозах в условиях таргетной терапии / О.А. Безнос // Российский биотерапевтический журнал. - 2017. - №16. - С.18-24. 7. Грицаев, С. В. Острый миелоидный лейкоз и минимальная резидуальная болезнь / С.В. Грицаева. Бюл. СО РАМН. - 2018. - № 2. - С.6-13. 8. Гривцова, Л. Ю. К дальнейшей стандартизации определения остаточных бластных клеток в костном мозге детей с В-линейными острыми лимфобластными лейкозами на 15-й день индукционной терапии / Л.Ю. Гривцова. Иммунология гемопоэза 2015. - №8. – С. 35-54. 9. Гривцова, Л. Ю. Оценка минимальной резидуальной болезни при острых лимфобластных лейкозах из В-линейных предшественников у детей методом трехцветной проточной цитометрии / Л.Ю. Гривцова. Иммунология гемопоэза. - 2016. - №5. - С.8–33. 10. Гривцова, Л. Ю. Иммунологическая оценка гемодиллюции костного мозга при лабораторных исследованиях (на основании теста М. Локен) / Л.Ю. Гривцова // Медицинский алфавит 2015. -№18. - С.67–70. 11. Давыдова, Ю. О. Роль многоцветной проточной цитофлуориметрии в диагностике миелодиспластических синдромов / Ю.О. Давыдова // Онкогематология. 2018. - №13. – С. 63-72. 12. Захарова, Е. С. Мониторинг минимальной остаточной болезни в перспективе лечения острых лимфобластных лейкозов у детей / Е.С. Захарова // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2016. - №15. – С.34-41. 13. Лобанова, Т. И. Исследование минимальной остаточной болезни у пациентов с острыми миелоиднымт лейкозами методом многоцветной проточной цитофлуориметрии / Т.И. Лобанова // Онкогематология. - 2018. - №13. – С.83-102. 14. Литвинов, Д. В. Лечение острого лимфобластного лейкоза у детей: современные возможности и нерешенные проблемы / Д.В. Литвинов. Доктор.Ру. - 2015. - №10. – С. 30–77. 15. Ланкин, В. З. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечно-сосудистой системы / В.З. Ланкин // Кардиология. - 2015. - №7. - C.58 - 71. 16. Максимова, М. Ю. Перекисное окисление липидов и гемостатическая активация при ишемическом инсульте / М.Ю. Максимова // Автореф. дисс к. м. н. - 2016. – 129 с. 17. Максимова, М. Ю. Применение милдроната при транзиторных ишемических атаках / М.Ю. Максимов // Ж-л неврол. и псих. - 2017. - №6. - C.41-44. 18. Махро, А. В. Пренатальная гипергомоцистеинемия как модель окислительного стресса мозга / А.В. Махро // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 2018. - №1. - С.37- 39. 19. Попов, А. М. Мониторинг минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии у детей с острым лимфобластным лейкозом из В-линейных предшественников при помощи упрощенного подхода: возможности и ограничения / А.М. Попов // Иммунология гемопоэза 2015. – №7. – С. 36-43. 20. Попов, А. М. Применение проточной цитометрии для определения минимальной остаточной болезни у детей с острым лимфобластным лейкозом, получающих терапию по протоколам со сниженной интенсивностью / А.М. Попов // Онкогематология 2015. - №10. – С.44-55. 21. Попов, А. М. Проблемы иммунофенотипирования в России: опыт работы референс-центра кооперированной клинической группы «Москва-Берлин» / А.М. Попов // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2015. - №1. – С.58–61. 22. Поддубная, И.В. Иммунодиагностика гемобластозов / И.В. Поддубная // Клиническая онкогематол. М.: Медицина, 2016. – 412 с. 23. Паровичникова, Е. Н. Промежуточные результаты по лечению острых Ph-негативных лимфобластных лейкозов у взрослых больных (итоги российской исследовательской группы по лечению острых лимфобластных лейкозов (RALL)) / Е.Н. Паровичникова // Онкогематология. - 2014. - №3. – С.6–15. 24. Суслина, З. А. Оксидантный стресс и основные направления нейропротекции при нарушениях мозгового кровообращения / З.А. Суслина // Неврологический журнал. 2017. - № 4. - С. 4-18. 25. Суслина, З.А. Антиоксидантная терапия при ишемическом инсульте / З.А. Суслина // Ж. неврол. и психиатр. – 2017. - № 10. - С.34 – 38. 26. Суслина, З. А. Антиоксидантное действие милдроната и L-карнитина при лечении больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга / З.А. Суслина // Ж. экспер. и клин. фармакол., -2016. - №3. - С.32-35. 27. Савченко, В. Г. Острые лейкозы // В.Г. Савченко. М.: Медицина; 2016.— 412 с. 28. Тупицын, Н. Н. Иммунодиагностика опухолей крови на основании многоцветных (8-цветных панелей) Европейского консорциума по проточной цитометрии (Euroflow) / Н.Н. Тупицын // Иммунология гемопоэза. - 2015. - №13. - С.31–62. 29. Цаур, Г. А. Методические основы диагностики и мониторинга минимальной остаточной болезни при острых лейкозах у детей первого года жизни / Цуар // Онкогематология. 2016. - №11. – С. 62-74. 30. Цаур, Г. А. Делеции гена IKZF1 - независимый прогностический фактор у детей с острым лимфобластным лейкозом из B-линейных предшественников / Г.А, Цуар // Онкогематология 2016. - №11. – С. 33-48.
Читать дальше
Поможем с написанием такой-же работы от 500 р.
Лучшие эксперты сервиса ждут твоего задания

Похожие работы

практическое задание
Анализ журнала "Индекс. Досье на цензуру"
Количество страниц:
4
Оригинальность:
75%
Год сдачи:
2013
Предмет:
История журналистики
курсовая работа
Виды и типы муниципальных газет
Количество страниц:
40
Оригинальность:
93%
Год сдачи:
2021
Предмет:
История журналистики
курсовая работа
Особенности деятельности военного корреспондента на примере репортеров телеканала "Звезда"».
Количество страниц:
25
Оригинальность:
79%
Год сдачи:
2019
Предмет:
История журналистики
дипломная работа
"Радио России": история становления, редакционная политика, аудитория. (Имеется в виду радиостанция "Радио России")
Количество страниц:
70
Оригинальность:
61%
Год сдачи:
2015
Предмет:
История журналистики
курсовая работа
26. Центральное (всесоюзное) радиовещание: история создания и развития.
Количество страниц:
25
Оригинальность:
84%
Год сдачи:
2016
Предмет:
История журналистики

Поможем с работой
любого уровня сложности!

Это бесплатно и займет 1 минуту
image